בדיקות זיהום בבעלי חיים של מיקרואורגניזמים פתוגניים הן נקודת מניעת סיכונים חשובה לתאונות בטיחות ביולוגיות. פתוגנים הנישאים על ידי בעלי חיים נגועים יכולים להדביק עובדי ניסוי דרך אירוסולים באוויר, הפרשות וצואה במהלך הניתוח.
ניתוח הדבקה בבעלי חיים כרוך בהרדמה, מתן תרופות, איסוף דגימות, המתת חסד ונתיחת שלאחר המוות. ניתן לייחס את ניסוי עוברי העוף גם לניתוח של בעלי חיים נגועים, דבר שעלול לגרום לתאונות שונות. מאמר זה יסביר את סוגי התאונות, תוכניות חירום, פעולות באתר התאונה ומניעת תאונות אחד אחד.
1. סוגי תאונות במעבדת בעלי חיים
1.1 פצעי דקירה או חיתוך פצעי דקירה מתרחשים לעיתים קרובות בתהליך הרדמה, מתן תרופות, דגימה והזרקת עוברי עוף. פציעות חתך מתרחשות לעיתים קרובות במהלך ניתוח, אנטומיה וכו'.
1.2 עקיצות גירוד עקיצות גירוד מתרחשות לעיתים קרובות במהלך תהליך החלפת החול, הרדמה, מדידת טמפרטורה וכו'.
1.3 בריחת בעלי חיים מתרחשת לעיתים קרובות במהלך הרדמה והחלפת חול.
1.4 מנת יתר של הרדמה מנת יתר של הרדמה בבעלי חיים בינוניים וגדולים נחשבת לתאונה.
1.5 ניסוי בלתי צפוי של עוברי עוף
דקירות בעת חיסון עוברי עוף
· דליפות בעת איסוף וירוסים
· הנפלה בעת הובלת עוברי תרנגולות
2. תוכנית חירום לתאונות במעבדת בעלי חיים
2.1 בתגובה לתאונות אפשריות של ניסויים זיהומיים בבעלי חיים, על מנת להבטיח את הפעילות הבטוחה והיציבה של מעבדת הבטיחות הביולוגית, יש לגבש תוכנית יעילה לטיפול בתאונות.
2.2 עקרון נוהל הסילוק במקרה של תאונה הוא הגנה על בריאותם ובטיחותם של הצוות ולמזער את זיהום סביבת המעבדה והסביבה החיצונית.
2.3 העיקרון של נקיטת אמצעים הוא לשלוט בהתפשטות, לשלוט במקור הזיהום ולסילוק בטוח של חומרים מזוהמים ומקומות מזוהמים.
2.4 תוכנית החירום צריכה לכלול (לא רק): אדם אחראי, ארגון, תקשורת חירום, תוכן דוחות, נהלי הגנה ותגובה אישיים, ציוד חירום, תוכניות ודרכי פינוי, בידוד וחיטוי מקורות זיהום, בידוד וטיפול בצוות, בידוד ובקרה באתר, תקשורת סיכונים וכו'.
2.5 על המעבדה להכשיר את כל אנשי הצוות (כולל מבקרים) להכיר את נהלי החירום, נתיבי הפינוי ואתרי ההתכנסות לפינוי; לערוך לפחות תרגיל אחד בשנה.
3. נקודות מפתח בטיפול באתר בתאונות במעבדת בעלי חיים
כאשר מתרחשת תאונה עם בעל חיים במעבדה, סילוק במקום חשוב מאוד, וטיפול מדויק יפחית משמעותית את הסיכון לזיהום במעבדה ולזיהום של אנשי צוות. במקביל, המעבדה מצוידת בציוד עזרה ראשונה הכרחי ובציוד לטיפול ושימוש באתר. מיקום ערכת העזרה הראשונה: יש למקם באזור המגן. הרכב (כולל אך לא רק): 75% אתנול, יודופור, פלסטר, גזה, תחבושת, מספריים/פינצטה, סרט רפואי וכו'.
01) טיפול במקום בפגיעות דקירה/חתך, שריטות ונשיכות
① יש לעצור את הניסוי באופן מיידי ולהניח את חיות הניסוי בכלוב אטום.
② נסיין אחר ריסס אתנול 75% על הפצוע והסיר את כפפותיו (בארון הבטיחות הביולוגי)
③ לחצו על החלק בעזרת הידיים כדי שהדם יזרום החוצה, ושטפו את הפצע במים נקיים או במים ממי עיניים.
④ הוציאו את ערכת העזרה הראשונה ונגבו את העור והפצע המזוהמים עם יודופור או חומר חיטוי מתאים מספר פעמים.
⑤ חבוש את הפצע כראוי, לבש כפפות נקיות, ופנה וצא מהמעבדה בהתאם למסלול שנקבע.
⑥ דוח תאונה
⑦ הערכה רפואית/טיפול ייעודי בבית חולים/בידוד וכו'.
מוקד הטיפול באתר בתאונה מסוג זה:
① בעלי חיים מבוקרים
② נקו את הפצע
תמונה
02) טיפול באתר בבעלי חיים שברחו
① יש לעצור את הניסוי באופן מיידי ולבצע ציד. באופן עקרוני, אסור לצוות לעזוב את מעבדת בעלי החיים לפני לכידת בעל החיים הנמלט.
② אם מכרסם קטן בורח למעבדה, יש להשתמש מיד בפינצטה בעלת ידית ארוכה כדי לאחוז במהירות ובחוזקה את שורש הזנב, לתפוס את בעל החיים ולהכניסו לכלוב. אם בעל החיים בורח במהירות ולא קל לתפוס אותו בעזרת פינצטה, יש להשתמש בשקית רשת מיוחדת כדי לתפוס אותו. אם בעל החיים בורח למקום מתחת לציוד שאינו קל לתפוס, יש להשתמש בידית שקית הרשת (ניתן לפצל את שקית הרשת לידית ולשקית רשת) כדי להוציא את בעל החיים בזהירות מהציוד לפני התפיסה.
③ הגבירו את תדירות האוורור בתוך הבית, כסו את נתיב המילוט של בעל החיים ואת הדם וההפרשות שניתזו על ידי בעל החיים במטלית חיטוי רטובה או מגבת נייר למשך 30 דקות, לאחר מכן הניחו אותה במיכל המיועד לצורך אוטוקלאב; ודווחו לאדם התורן. ארגנו חיטוי שני.
מוקד הטיפול באתר בתאונה מסוג זה:
① בריחת מכרסמים מתרחשת בתדירות גבוהה יותר, ויש להגביל את הלכידה למעבדה. אין להיכנס לפאניקה ולחטוף מספר פעמים. יש למזער את הגירוי לבעלי החיים.
② באופן עקרוני, אסור שבעלי חיים נמלטים יעזבו את המעבדה לפני הדחתם, כדי למנוע מהם לברוח מהמעבדה לשטח הציבורי ולגרום לאירועים בריאותיים גדולים יותר.
03) טיפול במקום במנת יתר של הרדמה
סימנים של מנת יתר של הרדמה
קל: מתייחס לבעלי חיים ניסיוניים שהאטו משמעותית את קצב הנשימה שלהם וסובלים מהיפוקסיה קלה, כגון היפוקסיה קלה של הלשון, אך הם עדיין נושמים באופן סדיר. עומק הנשימה תקין, ולמערכת הדם אין מכשולים ברורים. לחץ הדם ודופק הלב תקינים.
חמור: תדירות הנשימה יורדת באופן דרסטי ולא סדיר, לפעמים לא, ולפתע היפוקסיה עמוקה ורדודה וברורה, כגון לשון סגולה, לחץ חלקי החמצן ורוויית החמצן בבדיקת הדם יורדים באופן משמעותי, ומערכת הדם מושפעת. אם קצב הלב מאט, לחץ הדם יורד. עם זאת, קיימים רפלקסים של הקרנית.
קריטי: דום נשימה, דופק לב איטי ולא סדיר, ירידה בלחץ דם או דום לב.
גישה
① כאשר הנשימה איטית ולא סדירה ביותר, אך פעימות הלב תקינות: יש לתת הנשמה מלאכותית - לחץ על בית החזה, ולבצע חומרי התחדשות מתאימים.
② כאשר הנשימה נעצרת ועדיין יש דופק: ① יש לבצע הנשמה מלאכותית, להשתמש במכונת הנשמה מלאכותית או בחמצן במידת הצורך (שאיפת חמצן מהווה 2%, CO95 מהווה 2%); ② יש להזריק תמיסת גלוקוז 5%; ③ יש לתת אדרנלין וחומר מרענן. יש להשתמש ב-50% סודיום ביקרבונט דרך הווריד לתיקון חמצת.
③ כאשר הנשימה והדופק נעצרים: הזרקה תוך-לבית של תמיסת אדרנלין ביחס של 1:10000. את ממריץ הנשימה ניקסמיר 25% מוזרק דרך הווריד או תוך-לב. הזרקה של 20 מ"ג/מ"ל דופמין מעלה את לחץ הדם. יש להשתמש ב-5% סודיום ביקרבונט דרך הווריד לתיקון חמצת.
מוקד הטיפול באתר בתאונה מסוג זה:
① בעלי חיים בינוניים וגדולים נוטים למנת יתר של הרדמה.
② למנוע שריטות ועקיצות במהלך עזרה ראשונה במהלך מנת יתר של הרדמה.
תמונה
04) טיפול בתאונות בניסוי עוברי עוף
דקירה במהלך חיסון עוברי עוף - הטיפול זהה לטיפול בפצע דקירה אחד
דליפות במהלך איסוף וירוסים - טיפול זהות ל"דליפות של חומרים מדבקים"
טיפול בהשלכה בעת הובלת עוברי עוף
① כסו את אזור הטיפה בנייר סופג, שפכו את חומר החיטוי המכיל 1% כלור זמין מבחוץ פנימה, עטפו את קליפת הביצה, חלמון הביצה ושאר המוצקים, אספו אותם בעזרת פינצטה והניחו אותם במיכל המיועד לאוטוקלב; ודווחו לאדם התורן. ארגנו חיטוי שני.
② יש למזוג חומר חיטוי ברדיוס של מטר אחד מאזור הנפילה ולפעול במשך 1 דקות.
③ לאחר ריסוס חומר חיטוי בכל רחבי האזור, הנסיין יוצא בהתאם למסלול שנקבע.
④ דווחו לצוות התורן לנקות את המעבדה בפעם השנייה.
מוקד הטיפול באתר בתאונה מסוג זה:
① חלמון הביצה מסווג כחומר מוצק ויש לאסוף אותו תחת לחץ גבוה
② נוזל אלנטואי הוא צמיג ולוקח זמן רב יותר לחטא מאשר נוזלים רגילים.
③ בחירת חומר החיטוי תלויה בפתוגן בו משתמשים. חומר חיטוי המכיל כלור הוא חומר חיטוי כללי.
4. מניעת תאונות במעבדת בעלי חיים
01) דקירות מחט, חתכים, שריטות ונשיכות
① יש ללבוש כפפות מגן: כפפות נגד נשיכה/כפפות נגד חיתוך
② השתמשו במחזיק מתאים
③ יש לנתח לאחר שהחיה מורדמת לחלוטין.
02) בריחת בעלי חיים
① יש לנתח לאחר שהחיה מורדמת לחלוטין
② השתתף בהכשרה טכנית של בעלי חיים בבאודינג
③ פעולה בארון הבטיחות הביולוגי
④ ודאו שהכלוב מכוסה והחזירו אותו למחזיק הכלוב; פרימטים צריכים להיות מצוידים במנעולי כלוב מתאימים.
03) מנת יתר של הרדמה
① השתמש בחומרי הרדמה
② כמות קטנה של מתן מחולק
א) טמפרטורת הגוף של בעל החיים יורדת בקלות במהלך תקופת ההרדמה, ויש לנקוט באמצעי בידוד.
ב) ההזרקה תוך ורידית חייבת להיות איטית. במקביל, יש לשים לב למתח השרירים, לרפלקס הקרנית ולתגובה לצביטת העור. כאשר פעילויות אלו נחלשות באופן משמעותי או נעלמות, יש להפסיק את ההזרקה באופן מיידי. בעת ביצוע ניסויים כרוניים, בחורף הקר, יש לחמם את חומר ההרדמה לטמפרטורת גוף החיה לפני ההזרקה.
③ מצויד בעזרה ראשונה הרדמה: קרדיוטוני, ממריץ נשימתי, סודיום ביקרבונט (משמש לתיקון חמצת), גלוקוז היפרטוני (משמש להעלאת לחץ דם) וכו'.
04) ניסוי עוברי עוף
העברת העוברים משתמשת במיכל משלוח. עוברי עוף מחוסנים במיקרואורגניזמים צריכים להיות מועברים במעבדה באריזה כפולה, קשה, בלתי שבירה ועמידה בלחץ גבוה, כדי למנוע התזות ושפכים בעת נפילה, וכדי לכלוא את המיקרואורגניזמים הפתוגניים במיכל האריזה לצורך חיטוי ועיקור לאחר מכן.